GGGGCC C9ORF72 mutations d'expansion répétitives dans SLA: Une étude internationale d’expression de gène

Récemment, une expansion d'un GGGGCC hexa nucléotidique dans le gène C9ORF72 a été identifié comme une cause majeure de la sclérose latérale amyotrophique (SLA). C9ORF72 est une protéine mal caractérisé avec une fonction inconnue.Comment cette expansion de neurodégénération est causé est inconnu. La perte d’expression de l'allèle mutante et un dipeptide toxique " gain de fonction" de l'ARN ou de protéines dipeptides, obtenu par la transcription ou la traduction, respectivement, de l'expansion ont été présentés comme des mécanismes de la maladie. Le gène C9ORF72 code au moins 3 transcrits différents d'ARNm (figure). Une différence dans la transcription-initiation et un épissage alternatif résulte dans trois variantes de transcription C9ORF72 ARNm. Pour la variante de transcription 1 ( V1 ) l'expansion de GGGGCC est situé dans la région promoteur,pour la transcription variante 2 ( V2 ) et la variante 3 ( V3 ), elle est situé dans l'intron 1 (figure ).

Le but de cette étude est d'examiner la ion spécifique de l’expression de la C9ORF72 ARNm chez les patients sporadiques et familiales de SLA qui ne sont pas porteur de cette expansion mutante répétée.Grâce à des efforts conjoints avec UMC Utrecht, aux Pays-Bas et l'Université de Brescia, en Italie, des échantillons de personnes de contrôle sains, de patients SLA sporadiques, de patients de SLA avec une mutation répétitive et des individus pré symptomatiques avec un C9ORF72 GGGGCC, sont disponible à Louvain. Des essais spécifique C9ORF72 V1, V2 et V3 et toutes les transcriptions théoriques qui peuvent mesurer C9ORF72, ont été mis au point et largement validé à l'égard de leur spécificité et leur efficacité.

Ces tests peuvent être utilisés pour effectuer des réactions de chaînes de polymérase quantitatives (PCR), ce qui nous permet de :

(I ) déterminer la corrélation entre l'expression des différents transcrits C9ORF72 et l'âge des personnes de contrôle,

( ii) d' étudier la relation entre l'expression des différents transcrits C9ORF72 et l' apparition de la maladie et de la corrélation de la survie chez les patients SLA sporadique,

( iii) d’examiner l'influence de la GGGGCC d'expansion sur l'expression des différents transcrits C9ORF72 chez les patients SLA et

( iv) de personnes pré- symptomatiques avec l'expansion C9ORF72 GGGGCC pour déterminer si la mutation affecte l'expression déjà avant que la maladie se manifeste.

La validation des résultats sera effectuée en utilisant les dernières technologies dans des réactions en chaîne de la polymérase, appelée goutte numérique PCR.

Aucune étude n'a été faite afin de déterminer l’expression spécifique de transcription exacte de C9ORF72, avec ou sans la mutation expansion GGGGCC, dans une grande cohorte de patients atteints de SLA et les contrôles. Les résultats nous montreront si l y a perte de l'expression de l'allèle mutant par la présence de la mutation. Par conséquent, cela indiquera si C9ORF72 haplo insuffisance est une cause possible de la neurodégénérescence dans la SLA. Ceci a des implications importantes pour ( i ) le développement de modèles animaux à des fins de recherche et ( ii ) l'utilisation de C9orf72als SLA bio marqueur dans la clinique, non seulement dans le diagnostic définitif de la SLA, ainsi que la SLA prédicteur.

Cette recherche a été commanditée par « A cure for ALS ».

Louis De Muynck

Centre de recherche Vésale, VIB - KULeuven

Traduction : Ghislain d’Amour